miR-663高甲基化可能与胰腺癌相关

近日，解放军第105医院和南京医科大学第一附属医院的研究人员共同发表论文，旨在分析胰腺癌细胞株PANC1与正常胰腺组织表达有差异的启动子区甲基化miRNA，寻找与胰腺癌相关的高甲基化miRNA。研究指出，胰腺癌细胞株与正常胰腺组织间存在差异表达的高甲基化miRNA，其中miR-663高甲基化与胰腺癌可能相关。该文发表在2012年第12卷第1期《中华胰腺病杂志》上。

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　　抽提PANC1与正常胰腺组织基因组DNA，超声断裂。应用抗5-甲基化嘧啶核苷抗体和免疫磁珠法获取甲基化DNA片段。通过DNA甲基化芯片筛选出PANC1与正常胰腺组织表达差异的高甲基化miRNA，采用重亚硫酸盐修饰的PCR（BSP）和TA克隆测序的方法进行验证。提取胰腺癌细胞株BxPC3、CFPAC1、PANC1、SW1990基因组DNA，采用结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法（combined bisulfite restriction analysis，COBRA）验证芯片筛选出的差异表达的甲基化miRNA。

　　PANC1细胞与正常胰腺组织存在8个差异表达的甲基化miRNA，从中挑选出5个进行BSP+ TA克隆测序验证，其中miR-615、miR-663、miR-663b在PANC1细胞的甲基化率明显高于正常组织；miR-675的甲基化率与正常胰腺组织无明显差异；miR1826因测序结果误差较大而舍去。经COBRA验证，PANC1的上述4种miRNA均高甲基化；BxPC除miR-675外，其他3种均高甲基化；CFPAC1的miR-663、miR-663b高甲基化；SW1990的miR-615、miR-663高甲基化。

<br/>来源：医学论坛网