乙肝分子诊断：乙肝病毒（HBV）常见耐药位点检测

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）属啫肝DNA病毒科，基因组长约3.2Kb，为部分双链环状DNA。乙型肝炎是全球广泛分布的传染病，但不同地区HBV感染的流行强度差异很大。据世界卫生组织报道，全球约20亿人曾感染过HBV，其中3.5亿人为慢性HBV感染者，每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和肝癌。2006年全国乙型肝炎流行病学调查结果表明，我国1～59岁一般人群乙肝病毒表面抗原（HBV surface antigen,HBsAg）携带率为7.18%，5岁以下儿童的HbsAg携带率仅为0.96%。据此推算，我国现有的慢性HBV感染者约有9300万人，其中慢性乙型肝炎患者约2000万例。我国每年因肝病死亡的约有30万人左右。

近年来，慢性乙型肝炎的治疗取得了很大改善，目前获得批准的用于治疗慢性乙型肝炎的药物有两大类，一类是干扰素，一类是核苷类似物。目前已经上市的核苷类似物药物有5种，分别是拉米夫定（Lamivudine，LAM，1998年上市）、阿德福韦酯（Adefovir，ADV，2002年上市）、恩替卡韦（Entecavir，ETV，2005年上市）、替比夫定（Telbivudine，LDT，2007年上市）、替诺福韦（Tenofovir，TDF）、恩曲他滨（Emtricitabine，FTC）。这类药物是通过干扰病毒的逆转录过程和抑制DNA合成来抑制病毒DNA的复制，使患者的病毒DNA水平快速下降。这类药物的优势在于口服药物且安全可靠。
但是核苷类似物药物只能抑制病毒复制，而不能根除病毒，因此需要长期使用。而随着核苷类药物在国内使用频率及年限的增加，HBV耐药突变率逐年增高，例如1998年批准使用的拉米夫定（LAM），治疗1～4年的基因耐药率分别为14%、38%、49%、66%，且呈现继续上升趋势，其他类药物也出现不同程度的耐药性。

目前报道的核苷类似物药物：拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦、替比夫定、替诺福韦、恩曲他滨在中国人群中常见的耐药基因突变位点有18个。rtV173L、rtL179P、rtL180M、rtA181V∕T、rtT184A∕G∕I∕S、rtA194T∕M、rtA200V、rtS202G∕I、rtM204V∕I∕S、rtV207M∕I∕L、rtS213T、rtV214A、rtQ215S、rtN236T、rtP237H、rtN238T∕D、rtK241E、rtM250V。耐药位点基因突变导致病人对核苷类似物产生耐药后，病人血清的谷丙转氨酶水平和病毒DNA水平升高，甚至病情恶化。

其中：

（1）rtV173L、rtL179P、rtL180M、rtA200V、rtM204V∕I∕S、rtV207M∕I∕L、rtS213T与拉米夫定的耐药有关；

（2）rtA181V∕T、rtK241E、rtQ215S、rtN236T、rtP237H、rtN238T∕D、rtV214A与阿德福韦酯耐药有关。

（3）（3）rtV173L、rtL180M、rtT184A∕G∕I∕S、rtS202G∕I、rtM204V∕I∕S、rtM250V与恩替卡韦的耐药有关；

（4）rtM204V∕I∕S与替比夫定耐药有关

（5）rtA194T∕M与替诺福韦耐药有关；

（6）rtV173L、rtM204V∕I∕S、rtL180M与恩曲他滨的耐药有关；