Cell Stem Cell：纯化人类活细胞的新技术

  多能干细胞之所有非常流行，其中一个原因就是其可以分化分化成为任何类型的细胞以用于医学研究，然而典型的分化步骤往往会导致异源群体的产生，这样一来研究者所需的理想类型的细胞就必须被纯化；正常情况下，同理想细胞表面受体相互作用的抗体往往就可以帮助进行细胞纯化，但在很多情况下纯化的水平并不高，从而就会引发细胞受损；近日刊登在国际杂志Cell Stem Cell上的一篇研究论文中，来自京都大学的研究人员通过研究开发了一种新型的RNA技术，其可以对人类活细胞进行高效地纯化。
  研究者Hirohide Saito说道，这种最新的RNA技术就是设计一种miRNA开关来对活细胞检测并且分类，但并非对细胞表面受体进行分类；miRNA是一种很好的细胞类型标志物，其可以被用于改善纯化水平。这种miRNA开关由合成性的mRNA序列组成，而这种序列又包括一段可以识别miRNA的序列以及可以编码目的基因的一段开放阅读框，比如可以释放荧光或促进细胞死亡的调节性蛋白，如果miRNA识别序列结合到目的细胞中表达的miRNA上时，调节性蛋白的表达就会被抑制，随后就可以对包含或不包含miRNA的细胞类型进行区分。
  目前研究者已经研究揭示了iPS细胞如何被用于抵御心脏病，但因为纯度问题往往带来了很多问题，心肌细胞尤其难以被纯化，因为其并不会表达特殊的表面受体，因此本文研究中研究人员联合研究调查了miRNA开关对细胞纯化的有效性。通过将miRNA开关应用于一种确定的心肌细胞系中，研究人员就可以鉴别出对心肌细胞特殊的miRNAs；研究者表示，这种工具非常简单，而且有时候还可以被用于进行任何器官的研究。
  目前研究人员根据细胞发育的改变开发出了不同的miRNA开关，这就表明miRNA的战略性选择或可在细胞发育的对心肌细胞进行有效性分离，从而就可以潜在地提高细胞治疗的效果；最后研究者Saito说道，随着后期的研究我们相信miRNA开关或可用于所有细胞阶段的所有细胞类型中，我们的目的就是开发一种活性的miRNA此前来进行任何类型细胞的研究。（转化医学网360zhyx.com）
  以上为转化医学网原创翻译整理，转载请注明出处和链接！
转化医学网推荐的原文摘要：

Efficient Detection and Purification of Cell Populations Using Synthetic MicroRNA Switches
Cell Stem Cell doi:10.1016/j.stem.2015.04.005
Kenji Miki1, 2, 7, Kei Endo1, 3, 7, Seiya Takahashi1, Shunsuke Funakoshi1, 4, Ikue Takei1, Shota Katayama1, Taro Toyoda1, Maki Kotaka1, Tadashi Takaki1, Masayuki Umeda1, 5, Chikako Okubo1, Misato Nishikawa1, Akiko Oishi1, Megumi Narita1, Ito Miyashita1, Kanako Asano1, Karin Hayashi1, Kenji Osafune1, Shinya Yamanaka1, 2, 6, Hirohide Saito1, , , Yoshinori Yoshida1, ,
Isolation of specific cell types, including pluripotent stem cell (PSC)-derived populations, is frequently accomplished using cell surface antigens expressed by the cells of interest. However, specific antigens for many cell types have not been identified, making their isolation difficult. Here, we describe an efficient method for purifying cells based on endogenous miRNA activity. We designed synthetic mRNAs encoding a fluorescent protein tagged with sequences targeted by miRNAs expressed by the cells of interest. These miRNA switches control their translation levels by sensing miRNA activities. Several miRNA switches (miR-1-, miR-208a-, and miR-499a-5p-switches) efficiently purified cardiomyocytes differentiated from human PSCs, and switches encoding the apoptosis inducer Bim enriched for cardiomyocytes without cell sorting. This approach is generally applicable, as miR-126-, miR-122-5p-, and miR-375-switches purified endothelial cells, hepatocytes, and insulin-producing cells differentiated from hPSCs, respectively. Thus, miRNA switches can purify cell populations for which other isolation strategies are unavailable.