科学家或可用CRISPR技术来治疗血友病

  血友病患者往往生活在压力和焦虑之中，病人的关节会过早破损衰退，而且其一旦机体流血就很难止血，血友病患者机体缺少一种制造凝血因子的能力，因此任何切伤和挫伤，如果得不到紧急治疗就会使得患者有生命危险。
  在5000个新生男孩儿中就会有1人患血友病A(hemophilia A)，而几乎一半的患者都被认为是因为机体的染色体倒置而引发的疾病；机体细胞一旦发生染色体倒置就会使得染色体上的碱基对顺序被颠倒，从而就会导致基因不能够正常表达，而且患者机体会缺失凝血因子VIII基因（F8），这种因子在正常个体中会帮助机体促进凝血。
  最近，一项发表于国际杂志Cell Stem Cell上的研究论文中，来自延世大学等处的研究人员通过研究，对血友病A派生的诱导多能干细胞（iPSCs）及血友病小鼠进行研究，发现了一种新方法可以纠正引发血友病的染色体倒置，同时还可以逆转患者机体中凝血因子的缺失。
  这项研究中研究者首次利用诱导多能干细胞来进行研究，诱导多能干细胞拥有转化为机体任何类型细胞的能力，研究者对染色体倒置引发的血友病患者机体的尿液细胞进行收集，并以此制造诱导多能干细胞，随后他们利用CRISPR-Cas9 核酸酶对干细胞进行操作。
  CRISPR-Cas9可以修正凝血因子VIII基因的功能使其发挥正常功能，而修正后的iPSCs就可以被诱导分化成为成熟的可以表达凝血因子VIII的内皮细胞，这些新产生的内皮细胞就可以逆转凝血因子VIII的缺失。为了证实整个操作过程是有效的，研究者将修正后的内皮细胞移植入凝血因子VIII缺失的小鼠机体中，结果发现移植后小鼠就开始产生凝血因子VIII，这就可以有效抑制血友病的发病和表现。
  研究者Jin-Soo Kim说道，我们利用CRISPR RGENs技术（RNA引导的工程化核酸酶）就可以修复两种复发的大型的染色体倒置，而这两种染色体倒置可以引发几乎一半的严重血友病病例，这项研究报告首次阐明，利用 RGENs技术可以修复染色体倒置或其它大型的染色体重排问题。
  研究者还表示，当然同样重要的是逆转染色体的倒置目前并没有证据显示会存在脱靶突变，整个过程都非常精确，因此研究者表示，这项研究或为后期开发精细化的诊断技术甚至治疗手段来治疗血友病提供了新的研究思路和帮助。（转化医学网360zhyx.com）

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Functional Correction of Large Factor VIII Gene Chromosomal Inversions in Hemophilia A Patient-Derived iPSCs Using CRISPR-Cas9
Cell Stem Cell doi:10.1016/j.stem.2015.07.001
Chul-Yong Park1, 6, Duk Hyoung Kim2, 3, 6, Jeong Sang Son4, 6, Jin Jea Sung1, Jaehun Lee4, Sangsu Bae5, Jong-Hoon Kim4, 7, Dong-Wook Kim1, 7, , , Jin-Soo Kim2, 3, 7, ,
Hemophilia A is an X-linked genetic disorder caused by mutations in the F8 gene, which encodes the blood coagulation factor VIII. Almost half of all severe hemophilia A cases result from two gross (140-kbp or 600-kbp) chromosomal inversions that involve introns 1 and 22 of the F8 gene, respectively. We derived induced pluripotent stem cells (iPSCs) from patients with these inversion genotypes and used CRISPR-Cas9 nucleases to revert these chromosomal segments back to the WT situation. We isolated inversion-corrected iPSCs with frequencies of up to 6.7% without detectable off-target mutations based on whole-genome sequencing or targeted deep sequencing. Endothelial cells differentiated from corrected iPSCs expressed the F8 gene and functionally rescued factor VIII deficiency in an otherwise lethal mouse model of hemophilia. Our results therefore provide a proof of principle for functional correction of large chromosomal rearrangements in patient-derived iPSCs and suggest potential therapeutic applications.