国内外泌体领域进展总结(2018年6月)

6月份国内新出的外泌体和细胞外膜泡领域论文不完全统计有51篇。本期文章数量虽不算多，但是本期高分文献特别多。IF>10的有8篇，分别来自武汉大学、天津医科大学（2）、浙江大学、苏大、香港城市大学、香港大学、南方医科大学；IF>5的18篇。本期主要内容包括：外泌体的修饰、药物递送、间充质干细胞与心梗修复、血管渗漏和凝血病、钙粘蛋白与血管生成、各类癌症中发生发展机制与诊疗应用等方面内容。内容十分丰富，不容错过。

1. 武汉大学张先正教授：一种简单的淋巴细胞修饰方案用于系统性癌症治疗

Zheng, D. W., et al. (2018). "A Simply Modified Lymphocyte for Systematic Cancer Therapy." Adv Mater: e1801622.  IF=21.95

细胞疗法已经在癌症治疗领域受到相当大的关注，并且已经应用各种化学或遗传方法来重塑天然细胞以改善细胞疗法的治疗结果。这里报道了一种通过使用临床使用的分子δ-氨基乙酰丙酸（δ-ALA）修饰淋巴细胞以进行癌症治疗的简单方法。在与该分子温育后，靶向肿瘤的淋巴细胞自发合成抗肿瘤药物原卟啉X（PpIX），并特异性积聚在癌组织中。在定期的630 nm激光照射下，淋巴细胞产生含有PpIX的囊泡样凋亡小体（Ab），促进Ab输送PpIX，在第二次照射下对Ras突变的癌细胞具有优异的治疗效果。重要的是，该研究进一步设计了微流体装置以通过一步操作来简化细胞分选和药物合成，这可以促进该策略的普遍化。体外和体内研究证实了这种易于操作和全面调节的癌症治疗策略的效果。

2.  天津医大尹海芳团队：开发出新型外泌体高效修饰方法将大力促进外泌体的诊断与治疗应用

Gao, X., et al. (2018). "Anchor peptide captures, targets, and loads exosomes of diverse origins for diagnostics and therapy." Sci Transl Med 10(444). IF=16.71

外泌体是大分子的循环纳米载体，越来越多地用于诊断和治疗。在不改变外泌体表面的情况下修饰患者来源的外泌体的能力是其治疗潜力开发的关键。来自天津医科大学的尹海芳研究团队证明通过噬菌体展示鉴定的肽（CP05）通过结合外泌体表面蛋白CD63使得不同来源的外泌体（包括患者来源的外泌体）靶向、装载和捕获外泌体成为可能。与CP05-PMO相比，装有CP05修饰的肌营养不良蛋白剪接校正磷酸二酰胺吗啉寡聚物（EXOPMO）的外泌体的系统性施用使得肌营养不良蛋白缺乏的mdx小鼠肌养蛋白增加18倍。在EXOPMO上加载CP05-肌肉靶向肽进一步增加了肌肉中的肌养蛋白表达，其功能改善没有任何可检测到的毒性。该研究研究表明，外泌体锚肽能够直接、有效地功能化和捕获外泌体，从而为外泌体工程化，探索体内基因功能和靶向治疗药物递送提供工具。

前期详细报道：

【Science Translational Medicine】天津医大尹海芳团队开发新型外泌体修饰方法促进外泌体诊断与治疗应用

3.    浙江大学第二附属医院胡新央、王建安教授团队：间充质干细胞移植通过外泌体mir-125b的转移减少梗塞心脏中的自噬流

Xiao, C., et al. (2018). "Transplanted Mesenchymal Stem Cells Reduce Autophagic Flux in Infarcted Hearts via the Exosomal Transfer of mir-125b." Circ Res. IF=15.211

基本原理：自噬可以在轻度缺血性应激条件下通过降解损伤的细胞器来保存ATP产生的细胞活力，但是在严重缺血的情况下，它可以促进细胞死亡并恶化心脏功能。间充质干细胞（MSC）在心肌梗塞（MI）动物模型中进行测试时具有心脏保护作用，但这些益处是否通过调节自噬发生尚不清楚。目的：确定移植的MSCs是否能降低梗死心脏中自噬降解的速率（自噬流），如果是这样，则表征所涉及的机制。方法和结果：MSCs移植治疗改善了梗死小鼠心脏的心脏功能和梗死面积，同时减少了细胞凋亡和自噬流（BafA1诱导的LC3-II积聚和自噬体/自体溶酶体发生率）的测量。在缺氧和血清剥夺（H/SD）培养的新生小鼠心肌细胞（NMCM）中，当细胞与MSC或MSC分泌的外泌体一起培养时，自噬流和细胞死亡以及p53-Bnip3信号传导下降，与MSCs分泌的外泌体（MSC-exo）相关的基因通过用外泌体抑制剂GW4869预处理而大部分被消除。此外，在H/SD培养的NMCM中，通过调节p53-Bnip3信号传导，外泌体寡核苷酸miR-125b的模拟物减少，或抗-miR-125b寡核苷酸增加时，自噬流和细胞死亡增加。在体内小鼠MI模型中，从MSCs获得的外泌体（MSCs-exo），重现了与体外实验相同的结果，而从抗miR-125b寡核苷酸预处理的MSC获得的外泌体（MSCs-exoanti-miR-125b）没有效果。此外，MSCs-exo治疗组的梗死面积和心脏功能显著优于MSCs-exoanti-miR-125b组。结论：MI后移植MSCs提供的有益作用至少部分归因于通过主要含有miR-125b-5p的外泌体改善的自噬流。

4.    天津医科大学总医院院长张建宁教授、兰州大学基础医学院李敏教授等：VWF在创伤性脑损伤小鼠中增强微泡引起的血管渗漏和凝血病

Wu, Y., et al. (2018). "Von Willebrand factorenhanced microvesicle-induced vascular leakage and coagulopathy in mice with traumatic brain injury." Blood. IF=15.132

VWF是一种粘附配体，其活性受金属蛋白酶ADAMTS-13蛋白水解调节。血浆VWF水平升高已被广泛认为是创伤和炎症中内皮细胞活化的标志物，但其在这些病理状态中的因果作用仍未明确定义。使用流体撞击损伤小鼠模型，我们证明在急性创伤性脑损伤（TBI）期间释放的VWF被激活并且变成了微泡结合。VWF结合微泡促进全身血管渗漏和凝血。在TBI之前或之后给予的重组ADAMTS-13降低VWF反应性，而对VWF分泌的影响较小。rADAMTS-13保护内皮细胞屏障的完整性，并通过增强VWF切割而不损害基底止血来预防TBI诱导的凝血病。通过lactadherin促进微泡清除效果与rADAMTS-13相似。这项研究揭示了VWF和细胞微泡在TBI诱导的血管渗漏和凝血障碍之间的一种新的协同作用，并且证明了rADAMTS-13的保护作用。

5. 【综述】苏大一附院&中科院上海营养与健康研究院时玉舫、王莹研究员：炎症微环境调控干细胞的应用和机制

Shi, Y., et al.(2018). "Immuno regulatory mechanisms of mesenchymal stem and stromal cellsin inflammatory diseases." Nat Rev Nephrol.  IF=14.101

间充质干细胞（MSCs；也被称为间充质基质细胞）因其调节炎症过程的能力而受到很多关注。目前正在研究将它们的治疗潜力应用到各种退行性和炎性疾病，如克罗恩氏病、移植物抗宿主病、糖尿病性肾病和器官纤维化。MSCs发挥其治疗作用的机制是多方面的，但一般而言，这些细胞被认为能够使受损组织在剧烈炎症的存在下形成平衡的炎症和再生微环境。过去几年的研究表明，当暴露于炎症环境时，MSCs通过释放各种介质，包括免疫抑制分子、生长因子、外泌体、趋化因子、补体成分和各种代谢物，可以协调局部和系统的先天和适应性免疫反应。有趣的是，甚至无活力的MSCs也可以发挥有益作用，凋亡的MSCs在体内显示出免疫抑制功能。因为MSCs的免疫调节能力不是组成型的，而是被炎性细胞因子激活的，所以MSCs活化的效果可能取决于存在组织内的炎症水平和类型而变化。该综述回顾了当前对MSCs免疫调节机制的理解以及与其治疗应用有关的问题。

6.  香港城市大学黎月明教授团队：巧妙利用红细胞EVs进行RNA药物递送

Usman, W. M.,et al. (2018). "Efficient RNA drug delivery using red blood cellextra cellular vesicles." Nat Commun 9(1): 2359.  IF=12.353

由于低摄取效率和高细胞毒性，目前大多数可编程的RNA药物疗法的方法不适用于临床。细胞外囊泡（EVs）可以解决这些问题，因为它们代表细胞间通讯的自然模式。然而，目前用于EVs生产的来源细胞受限，并且在基因转移方面存在安全问题。一个潜在的理想来源可能是人类红细胞（RBCs）。红细胞可用作大规模EVs生产的通用供体，因为它们容易在血库中获得并且不含DNA。该研究描述和验证了一种新的策略，以生成大规模的RBC衍生的EVs，用于递送RNA药物，包括反义寡核苷酸、Cas9 mRNA和guide RNA。运用RBCEV的RNA药物递送在人类细胞和异种移植小鼠模型中显示高度稳健的微小RNA抑制和CRISPR-Cas9基因编辑效应，且没有可观察到的细胞毒性。

7. 香港大学生物科学学院副院长黄思齐教授团队：可溶性E-钙粘蛋白通过外泌体释放并促进肿瘤血管生成

Tang, M. K. S., et al. (2018). "SolubleE-cadherin promotes tumor angiogenesis and localizes to exosome surface."Nat Commun 9(1): 2270.  IF=12.353

目前，抗血管生成疗法的局限性需要其他机制的其他靶标来解决。该研究首次发现了在卵巢癌患者的恶性腹水中高度表达的可溶性E-钙粘蛋白（sE-cad）（80-kDa可溶形式）是血管生成的有效诱导剂。除了胞外域的脱落之外，还提供了进一步的证据表明sE-cad以外泌体形式大量释放。从机制上看，sE-cad阳性的外泌体介导内皮细胞上的VE-钙粘蛋白异源二聚化，并转导β-连环蛋白和NFκB信号传导的新型顺序激活。体内和临床数据证明sE-cad阳性外泌体与恶性腹水形成和广泛的腹膜扩散具有相关性。这些数据推动了我们对卵巢癌血管生成的分子调控的理解，并支持靶向sE-cad的治疗潜力。卵巢癌通过外泌体的sE-cad释放可能是诊断和预后的生物标志物。该研究是第一次在体外和体内证明了sE-cad是血管生成的关键调节剂。还提供证据证明外泌体是在此过程中切割和释放sE-cad的新型主要平台。

前期详细报道：

【Nature子刊】香港大学：可溶性E-钙粘蛋白通过外泌体释放并促进肿瘤血管生成

8. 南方医科大学南方医院郑磊教授、香港科技大学姚舒怀教授：单外泌体分析用于癌症诊断

Liu, C., et al. (2018)."Single-Exosome-Counting Immuno assays for Cancer Diagnostics." NanoLett.  IF=12.08

由肿瘤细胞释放的外泌体由于其独特的组成和功能已被认为是用于癌症诊断的有前景的生物标志物。存在于极少量的临床样品中的低浓度特异性外泌体的定量可用于非侵入性癌症诊断和预后。我们利用液滴微流体技术开发了一种用于目标外泌体数字鉴定的免疫吸附测定。通过产生荧光信号的酶促报告分子标记的夹心ELISA复合物将外泌体固定在磁性微珠上。将构建的珠粒进一步分离并包封入足够数量的小滴中，以确保只有单个小珠被包封在小滴中。该研究基于液滴的单外泌体计数酶联免疫测定（液滴数字ExoELISA）方法能够对癌症特异性外泌体进行绝对计数，从而实现前所未有的准确性。该方法能够达到每微升10个酶标记的外泌体复合物（约10^-17 M）的检测极限（LOD）。该报道展示了使用液滴数字ExoELISA平台定量检测来自乳腺癌患者的血浆样品中的外泌体。该方法可能具有对癌症进行早期诊断的潜力，并加速用于临床诊断的癌症外泌体生物标志物的发现。

9.    上海交大医学院附属第一人民医院裘正军课题组&瑞金医院苏丽萍课题组：缺氧诱导的外泌体miRNA通过PTEN/PI3Kγ介导M2巨噬细胞极化以促进胰腺癌转移

Wang, X., et al. (2018). "Hypoxictumor-derived exosomal miR-301a mediates M2 macrophage polarization viaPTEN/PI3Kgamma to promote pancreatic cancer metastasis." Cancer Res.  IF=9.13

外泌体正在成为肿瘤细胞与微环境之间交流的重要媒介。然而，外泌体在胰腺癌（PC）缺氧状态下调节肿瘤发展的机制在很大程度上仍然未知。该研究发现来自PC细胞的缺氧外泌体以HIF-1a或HIF-2a依赖性方式激活巨噬细胞向M2表型转变，进而促进PC细胞的迁移、侵袭和EMT。鉴于外泌体已被证明能够转运miRNAs以改变细胞功能，该研究发现miR-301a-3p在缺氧PC细胞中高度表达，并缺氧PC细胞衍生的外泌体中同样富含miR-301a-3p。循环外泌体miR-301a-3p水平与侵袭深度、淋巴结转移、晚期TNM分期和PC预后不良呈正相关。缺氧的外泌体miR-301a-3p通过激活PTEN/PI3Kγ信号传导途径诱导巨噬细胞的M2极化。PC细胞与miR-301a-3p被上调或低氧外泌体处理的巨噬细胞的共培养增强其转移能力。总的来说，这些数据表明PC细胞在缺氧微环境中产生富含miR-301a-3p的外泌体，然后极化巨噬细胞以促进PC细胞的恶性行为。靶向外泌体miR-301a-3p可为PC提供潜在的诊断和治疗策略。

前期详细报道：

缺氧诱导的外泌体miRNA通过PTEN /PI3Kγ介导M2巨噬细胞极化以促进胰腺癌转移

10. 南京医科大学江宏兵课题组：衰老相关的骨髓微环境中外泌体miR-31a-5p调节骨形成和骨吸收

Xu, R., et al. (2018). "MicroRNA-31a-5p from aging BMSCs links bone formation and resorption in the aged bone marrow microenvironment." Aging Cell: e12794. IF=7.627

骨髓微环境中年龄相关分子的改变是骨质疏松症的病因之一。这些分子通过调节成骨细胞和破骨细胞活性来抑制骨形成并促进骨吸收，从而导致与年龄相关的骨丢失。该研究观察到来自老龄大鼠的骨髓基质细胞（BMSC）中的miR-31a-5p水平显著增加，并且这些BMSC表现出脂肪生成和衰老表型增加、成骨和干性减少。使用gain-of-function和knockdown的方法来探究miR-31a-5p在成骨分化中的作用，调节E2F2的下降和募集衰老相关的异染色质病灶（SAHF），评估特定的AT富集序列结合蛋白2（SATB2）水平的减少和BMSCs的老化。值得注意的是，与年轻大鼠相比，促进破骨细胞生成和骨吸收的miR-31a-5p在老年大鼠的BMSCs衍生的外泌体中的表达水平显著升高，并且，如RhoA活性升高所示，抑制外泌体miR-31a-5p抑制了破骨细胞的分化和功能。此外，在骨髓微环境中，使用antagomiR-31a-5p，miR-31a-5p的抑制阻止了老年大鼠的骨丢失并且降低了破骨细胞活性。总的来说，该研究结果揭示miR-31a-5p通过影响成骨细胞和破骨细胞分化作为年龄相关骨髓微环境中的关键调节剂，并且其可能是与年龄相关的骨质疏松症的潜在治疗靶标。

前期详细报道：

Aging Cell：南京医科大学发现衰老相关的骨髓微环境中外泌体miR-31a-5p调节骨形成和骨吸收

11. 北京协和医学院赵春华教授：由肝癌细胞释放的外泌体赋予脂肪细胞促肿瘤的特性

Wang, S., et al. (2018). "Exosomes released by hepatocarcinoma cells endow adipocytes with tumor-promoting properties." JHematol Oncol 11(1): 82.  IF=7.333

背景：肝细胞癌（HCC）的发生和发展在很大程度上取决于其局部微环境。脂肪细胞是非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）肝脏微环境的重要组成部分，NAFLD是HCC的重要危险因素。鉴于NAFLD的全球流行，迫切需要更好地解析HCC细胞和脂肪细胞之间的相互作用。由恶性细胞释放的外泌体代表了细胞-细胞相互作用的新方式，并且已有研究表明其在癌细胞与其微环境的通信中发挥重要作用。该研究探讨了HCC衍生的外泌体在脂肪细胞向肿瘤促进细胞转化中的作用。方法：从HCC细胞系HepG2中分离外泌体，并加入脂肪细胞。使用基因表达谱分析外泌体刺激的脂肪细胞的转录组学改变，并通过RT-PCR和ELISA检测炎症相关细胞因子的分泌。体内小鼠异种移植模型用于评估外泌体处理的脂肪细胞的生长促进和血管生成增强作用。通过质谱法分析肿瘤外泌体的蛋白质含量。通过磷酸激酶抗体芯片和蛋白质印迹检测参与外泌体处理的脂肪细胞活化的磷酸激酶。结果：HCC细胞HepG2衍生的外泌体可以被脂肪细胞主动内化并引起显著的转录组学改变，特别是诱导脂肪细胞中的炎症表型。肿瘤外泌体处理的脂肪细胞，称为exo-脂肪细胞，促进肿瘤生长，增强血管生成，并在小鼠异种移植模型中募集更多巨噬细胞。在体外，来自exo-脂肪细胞的条件培养基促进HepG2细胞迁移并增加人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的管形成。从机理上讲，该研究发现了HepG2外泌体激活了exo-脂肪细胞中的几种磷酸激酶和NF-κB信号通路。另外，通过质谱法在HepG2外泌体中鉴定了总共1428种蛋白质。结论：该研究结果提供了肿瘤细胞衍生的外泌体可以教育周围脂肪细胞为肿瘤进展创造有利微环境这一概念的新见解。

12. 苏州大学庄文卓教授等：外泌体介导的lncRUNX2-AS1从多发性骨髓瘤细胞向MSCs的转移有助于成骨

Li, B., et al. (2018). "Exosome-mediated transfer of lncRUNX2-AS1 from multiple myeloma cells to MSCs contributes to osteogenesis." Oncogene.  IF=6.854

多发性骨髓瘤（MM）的特征在于间充质干细胞（MSC）的成骨潜能降低。癌细胞和癌基质细胞之间的通信是肿瘤进展的驱动因素。了解骨髓瘤-基质相互作用对于制定可逆转骨病的有效策略至关重要。该研究发现骨髓瘤细胞中的生物活性lncRNA RUNX2-AS1可以被包装到外泌体中并传递给MSCs，从而抑制MSC的成骨。RUNX2-AS1由RUNX2的反义链产生，富含源自MM患者的MSC（MM-MSC）。RUNX2-AS1能够在重叠区域与RUNX2  mRNA前体形成RNA双链体，并且该双链体通过降低剪接效率从而在转录上抑制RUNX2表达，导致MSC的成骨潜能降低。体内小鼠模型，施用外泌体分泌抑制剂GW4869，发现有效预防骨质流失，由骨形成和抗代谢活性维持。因此，外泌体lncRNA RUNX2-AS1可以作为MM中骨损伤的潜在治疗靶标。总之，该研究结果表明外泌体lncRUNX2-AS1通过独特的外泌体lncRUNX2-AS1/RUNX2途径在成骨分化中从MM细胞转移到MSC中的关键作用。

13. 第二军医大学长海医院高申教授、江西中医药大学药学院郭慧玲等：

Li, Y., et al.(2018). "A33 antibody-functionalized exosomes for targeted delivery of doxorubicin against colorectal Cancer." Nanomedicine.  IF=6.5

外泌体已成为一种有前途的药物载体，具有低免疫原性、高生物相容性和递送效率。该研究从A33阳性LIM1215细胞中分离外泌体（A33-Exo），并用阿霉素（Dox）进行加载。此外，表面涂覆羧基超顺磁性氧化铁纳米粒子（US）与A33抗体连接（A33Ab-US），期望纳米颗粒的表面上的这些A33抗体可结合至A33阳性外泌体并形成复合物（A33Ab-US- Exo/Dox）靶向A33阳性结肠癌细胞。结果显示A33Ab-US-Exo/Dox在LIM1215细胞中具有良好的结合亲和力和抗增殖作用。体内研究表明，A33Ab-US-Exo/Dox具有优异的肿瘤靶向能力，并且能够抑制肿瘤生长并减少小鼠的心脏毒性，从而延长其存活时间。总之，通过用高密度抗体包被靶向配体而功能化的外泌体可证明是针对人类癌症的靶向药物的新型递送系统。

14. 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室叶邦策教授、尹斌成教授：用于外泌体代谢组学分析的高效化学同位素标记液相色谱质谱法

Luo, X., et al. (2018). "High-Performance Chemical Isotope Labeling Liquid Chromatography Mass Spectrometry for Exosome Metabolomics." Anal Chem.  IF=6.042

循环外泌体是癌症诊断和监测生物标志物的丰富来源。虽然核酸分析是发现外泌体中循环生物标志物的主要工具，但代谢组学具有扩展生物标志物的化学多样性的潜力，其可以容易且快速地检测。由于只能从少量患者血液中分离出痕量的外泌体，因此需要非常灵敏的技术来分析外泌体的代谢组。该研究提出了一个工作流程，包括使用2 mL人血清的原料进行外泌体超速离心，在50％甲醇/水中进行冻融用于外泌体裂解和代谢物提取，差异化学同位素标记（CIL）代谢物用于增强液相色谱（LC）分离和改进质谱（MS）检测，以及纳流LC-MS（nLC-MS）分析。作为原理验证，研究使用丹酰化标记来分析两组外泌体样品中的胺- /酚-代谢组，每组从化学治疗前后的5名胰腺癌患者的血液样品中分离。第1组中总共2446个峰对（n=10），每个样品检测到的峰对或代谢物的平均数为1964+/-60，在第2组每个样品1948+/-117，总共2511个峰对（n=10）。在第1组和第2组中分别鉴定出101和94个代谢物，以及1580和1590个峰对，其精确质量与MyCompoundID代谢组数据库中的代谢物相匹配。分析掺有（13）C-标记的合并样品的（12）C标记的单个外泌体样品的混合物，可对处理前后收集的血液样品的外泌体的代谢组学变化进行相对定量。

15. 华中农业大学邓干臻教授：胎盘外泌体介导的Bta-miR-499-Lin28B/let-7轴调节早孕期间的炎症失调

Zhao, G., et al. (2018). "Placental exosome-mediated Bta-miR-499-Lin28B/let-7 axis regulates inflammatory bias during early pregnancy." Cell Death Dis 9(6): 704.  IF=5.638

母胎界面中的异常炎症导致哺乳动物的生殖障碍。盘外泌体参与妊娠期间的母胎交流。然而，胎盘或胎儿是否通过外泌体参与调节子宫局部炎症的平衡尚不清楚，须进一步探索其机制。该研究证明胎盘特异性外泌体在怀孕早期的奶牛外周血中丰富，并选择性加载miRNAs，如bta-miR-499。在体外，胎盘外泌体衍生的bta-miR-499通过Lin28B/let-7轴抑制NF-κB的活化，从而在牛子宫内膜上皮（BEND）细胞中抑制LPS诱导的炎症。随后，mmu-miR-499的抑制导致体内母胎界面的炎症平衡受损，最终胎盘丢失和胎儿生长受限导致妊娠失败的风险增加。因此，该数据表明，胎盘外泌体miR-499可能是乳牛和其他哺乳动物早期妊娠期母胎界面炎症平衡调节的关键免疫调节因子。

16. 复旦大学中山医院白春学教授、胡洁教授：PLAUR通过EGFR/P-AKT/Survivin信号通路赋予NSCLC对吉非替尼的耐药性

Zhou, J., et al. (2018). "PLAUR Confers Resistance to Gefitinib Through EGFR/P-AKT/Survivin Signaling Pathway." Cell Physiol Biochem 47(5): 1909-1924.  IF=5.5

背景/目的：酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼通过抑制表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶显著改善非小细胞肺癌（NSCLC）患者的存活率。但是，患者最终会通过无特征的机制对吉非替尼产生耐药性。已知纤溶酶原激活剂尿激酶受体（PLAUR）在细胞增殖、迁移和凋亡中起重要作用。然而，PLAUR的作用，特别是外泌型PLAUR在NSCLC吉非替尼耐药中的作用尚未见报道。本研究的目的是确定PLAUR与吉非替尼耐药之间的关系。方法：在本研究中，使用含有分子信标的阳离子脂质复合纳米颗粒（TCLN）生物芯片作为探针，检测吉非替尼敏感和抗性NSCLC患者血浆外泌体中的PLAUR mRNA。体外实时荧光定量PCR检测PLAUR mRNA的表达，Western blot检测相关蛋白的表达。基因敲低是通过基于慢病毒的RNA沉默技术实现的。CCK-8分析和EdU掺入用于检查细胞增殖。应用流式细胞术测定细胞凋亡和细胞周期，而JC-1染料测定法测定线粒体膜电位。通过cDNA微阵列鉴定受PLAUR敲低影响的信号途径。在体内分析PLAUR敲低对肿瘤发生的影响。结果：研究发现与吉非替尼敏感的NSCLC患者相比，吉非替尼耐药NSCLC患者血浆中的外泌体PLAUR mRNA显著增加。与吉非替尼敏感的PC9细胞相比，吉非替尼耐药的人肺腺癌PC9R细胞中的PLAUR mRNA和可溶性PLAUR蛋白也显著增加。在PC9R细胞中沉默PLAUR通过EGFR/p-AKT /生存素信号传导途径损害线粒体膜电位并增加细胞凋亡。此外，EGFR在吉非替尼耐药的PC9R细胞中上调，并且EGFR的敲低显著增加细胞凋亡。结论：总之，研究结果表明PLAUR通过EGFR/p-AKT/survivin信号通路在吉非替尼耐药的人肺腺癌细胞中诱导对geftinib的耐药。PLAUR可能成为吉非替尼耐药NSCLC患者的一种新型治疗靶点。

17. 北京大学肿瘤医院王天笑教授、中国医学科学院基础医学研究所葛微教授：

Luo, D., et al. (2018). "Proteomics study of serum exosomes from papillary thyroid cancer patient." Endocr Relat Cancer.  IF=5.331

乳头状甲状腺癌（PTC）中的淋巴结转移（LNM）与复发风险增加和预后不良有关。已有研究显示肿瘤外泌体与癌细胞的转移相关。因此，该研究目的是确定PTC淋巴结转移中血清外泌体的特征和生物学功能。使用液相色谱-串联质谱分析和串联质量标签定量分析的组合，比较了来自PTC患者的LNM，没有LNM的PTC患者和健康供体的血清纯化外泌体（SPE）的蛋白质组谱。通过两种或更多种独特的肽鉴定了1569种蛋白质。与没有LNM的PTC患者的SPE相比，PTC患者的SPE中发现了697种差异表达蛋白。研究结果揭示了特异性蛋白的过表达与癌细胞转移的良好关系，如SRC、TLN1、ITGB2和CAPNS1。与质谱结果一致，蛋白质印迹验证了这些蛋白质在个体样品中的表达。生物学途径分析显示，与没有LNM的患者相比，PTC患者的SPE患者的整合素信号传导异常激活。研究表明PTC淋巴结转移患者的SPE促进BHT101甲状腺癌细胞侵袭，但对细胞迁移没有明显影响。在具有LNM的PTC患者的血清外泌体中，整联蛋白相关蛋白明显上调。这些蛋白质组学研究结果将有助于阐明肿瘤来源的外泌体的病理生理功能。

18. 外泌体快速靶向递送Hsa-miR-590-3p调节细胞周期治疗急性心肌梗死

Wang, Y., et al. (2018). "Rapid Delivery of Hsa-miR-590-3p Using Targeted Exosomes to Treat Acute Myocardial InfarctionThrough Regulation of the Cell Cycle." J Biomed Nanotechnol 14(5):968-977.  IF=5.068

由于心肌细胞再生能力弱，急性心肌梗塞导致心力衰竭。因此，促进心肌细胞增殖是恢复心脏功能的关键。诱导细胞周期和抑制心肌细胞增殖基因的下调可以诱导心肌细胞重新进入增殖状态。Hsa-miR-590-3p在心肌增殖中具有良好的应用前景，因为它可以下调抑制细胞增殖的基因如Hopx的表达。然而，有效且快速地用非侵入性和非病毒方法向梗塞区域递送足够的hsa-miR-590-3p是具有挑战性的。基于cTnI在梗死区微环境中的高表达，我们利用基因转染在间充质干细胞表面表达cTnI靶向短肽，以获得靶向cTnI的外泌体。这些外泌体可沿cTnI浓度梯度定位于梗塞区域。携带hsa-miR-590-3p的外泌体被心肌细胞内吞，因此促进梗塞周围区域的心肌细胞增殖并最终恢复心脏功能。该结果表明，靶向外泌体是一种用于治疗急性心肌梗塞的微创、非病毒、高效、快速的递送系统。

19. 山西医科大学：脂肪来源的间充质干细胞分泌的外泌体调节来自患有压力性尿失禁的女性成纤维细胞中的I型胶原代谢

Liu, X., et al. (2018). "Exosomes secreted byadipose-derived mesenchymal stem cells regulate type I collagen metabolism infibroblasts from women with stress urinary incontinence." Stem Cell ResTher 9(1): 159.  IF=4.963

20. 中南大学第三湘雅医院等：人间充质干细胞外泌体增强猪胰岛对缺氧的抵抗能力

Nie, W., et al. (2018). "Human mesenchymal-stem-cells-derived exosomes are important in enhancing porcineislet resistance to hypoxia." Xeno transplantation: e12405.  IF=4.717

21. 天津医科大学总医院：内皮集落形成细胞衍生的外泌体恢复创伤性脑损伤小鼠的血脑屏障连续性

Gao, W., et al. (2018). "Endothelial colony-forming cell-derived exosomes restore blood-brain barrier continuity inmice subjected to traumatic brain injury." Exp Neurol 307: 99-108.  IF=4.483

22. 【综述】台湾大学：外泌体在癌症发展和临床上的应用

Tai, Y. L., et al. (2018). "Exosomes in cancer development and clinical applications." Cancer Sci.  IF=4.372

23. 【综述】中山大学孙逸仙纪念医院：外泌体——血管钙化的信息传递者

Zhang, C., et al. (2018). "Exosomes, the message transporters in vascular calcification." J Cell Mol Med.  IF=4.302

24. 昆明市第一人民医院：表达GATA-4的小鼠骨髓间充质干细胞通过分泌的外泌体改善心肌梗塞后的心脏功能

He, J. G., et al. (2018). "GATA-4-expressing mouse bone marrow mesenchymal stem cells improve cardiac function after myocardial infarction via secreted exosomes." Sci Rep 8(1): 9047.  IF=4.122

25. 【综述】北京大学口腔医学院：唾液外泌体——系统性疾病中的新兴角色

Han, Y., et al. (2018). "Salivary Exosomes:Emerging Roles in Systemic Disease." Int J Biol Sci 14(6): 633-643.  IF=4.057

26. 【综述】哈尔滨医科大学第二附属医院：干细胞外泌体在心血管疾病中的作用——小颗粒的大作用

Yuan, Y., et al.(2018). "Stem Cell-Derived Exosome in Cardiovascular Diseases: Macro Rolesof Micro Particles." Front Pharmacol 9: 547.  IF=3.831

27. 【综述】南通大学第三附属医院、无锡市锡山人民医院、复旦大学附属金山医院：破骨细胞衍生的细胞外囊泡是破骨细胞生成和破骨细胞-成骨细胞通讯的新型调节剂

Yuan, F. L., et al. (2018)."Osteoclast-Derived Extracellular Vesicles: Novel Regulators of Osteoclastogenesis and Osteoclast-Osteoblasts Communication in Bone Remodeling." Front Physiol 9: 628. IF=3.394

28. 复旦大学中山医院、同济大学附属上海市第十人民医院：内皮祖细胞外泌体通过转移miR-126改善急性肺损伤

Wu, X., et al. (2018). "Exosomes derived from endothelial progenitor cells ameliorate acute lung injury by transferring miR-126." Exp Cell Res.  IF=3.309

29. 第四军医大学西京医院：细胞外囊泡对外源离子通道的运输精确操纵生物事件

Xing, B., et al. (2018). "Extracellular Vesicles-Directed Exogenous Ion Channels Transport for Precise Manipulation of Biological Events." Bioconjug Chem. IF=3.309

30. 南昌大学第一附属医院：脂肪来源的干细胞微泡释放的miR-210通过调节RUNX3促进内皮细胞的增殖、迁移和侵袭

Zheng, Z., et al. (2018). "Adipose-derivedstem cell-derived microvesicle-released miR-210 promoted proliferation, migration and invasion of endothelial cells by regulating RUNX3." CellCycle.  IF=3.304

31. 【综述】绍兴第二医院：间充质基质细胞衍生的细胞外囊泡——再生和免疫调节作用及其在败血症中的潜在应用

Zheng, G., et al. (2018). "Mesenchymal stromalcell-derived extracellular vesicles: regenerative and immunomodulatory effectsand potential applications in sepsis." Cell Tissue Res.  IF=3.043

32. 【综述】南京中医药大学附属医院：外泌体——腹膜功能的新介质

Yu, M., et al. (2018). "Exosomes: The New Mediator of Peritoneal Membrane Function." Kidney Blood Press Res 43(3):1010-1022.  IF=3

33. 中南大学：细胞外囊泡中的miRNA-21有助于受精卵的生长和小鼠的胚胎发育

Lv, C., et al. (2018). "MicroRNA-21 in extracellular vesicles contributes to the growth of fertilized eggs and embryo development in mice." Biosci Rep. IF=2.899

34. 四川大学华西医院：肺癌中的细胞外囊泡和ctDNA——生物标志物来源和治疗应用

Huang, C., et al. (2018). "Extracellular vesicles and ctDNA in lung cancer: biomarker sources and therapeutic applications." Cancer Chemother Pharmacol. IF=2.808

35. 台湾中原大学：基于PEG包被Fe3O4纳米颗粒的外泌体纯化

Chang, M., et al. (2018). "Exosome purification based on PEG-coated Fe3O4 nanoparticles." PLoS One 13(6):e0199438.  IF=2.766

36. 南方医科大学：源自乳腺癌肺转移亚群的外泌体促进肿瘤自身接种

Huang, H., etal. (2018). "Exosomes derived from breast cancer lung metastasis subpopulations promote tumor self-seeding." Biochem Biophys Res Commun.  IF=2.559

37. 【综述】南京医科大学第一附属医院：血浆miRNAs在胰腺癌的诊断和预后中的应用

Zhou, X., et al. (2018). "Plasma miRNAs indiagnosis and prognosis of pancreatic cancer: A miRNA expression analysis." Gene.  IF=2.498

38. 东南大学医学院附属江阴医院：源自骨髓间充质干细胞的外泌体通过MAPK途径促进成骨细胞增殖改善骨质疏松症

Zhao, P., et al. (2018). "Exosomes derivedfrom bone marrow mesenchymal stem cells improve osteoporosis through promoting osteoblast proliferation via MAPK pathway." Eur Rev Med Pharmacol Sci22(12): 3962-3970.  IF=2.387

39. 西安交通大学第二附属医院：胆脂瘤周围成纤维细胞外泌体miR-106b-5p的下调通过过表达血管生成素2促进内皮细胞的血管生成

Li, Y., et al. (2018). "Down-regulation ofexosomal miR-106b-5p derived from cholesteatoma perimatrix fibroblasts promotes angiogenesis in endothelial cells by overexpression of Angiopoietin 2."Cell Biol Int.  IF=1.936

40. 【综述】中国医学科学院北京协和医学院：细胞外囊泡在转移性乳腺癌中的作用

Peng, J., et al. (2018). "Roles of Extracellular Vesicles in Metastatic Breast Cancer." Breast Cancer (Auckl) 12:1178223418767666.  IF=1.772

41. 南京医科大学附属肿瘤医院：外泌体通过递送miR-21在肺癌HCC827细胞中介导吉非替尼抗性

Jing, C., etal. (2018). "Exosome-mediated gefitinib resistance in lung cancer HCC827 cells via delivery of miR-21." Oncol Lett 15(6): 9811-9817.  IF=1.664

42. 锦州医科大学： CXXC5的过表达是ER阳性乳腺癌的一个很差的预后因素

Fang, L., et al. (2018). "Overexpression ofCXXC5 is a strong poor prognostic factor in ER+ breast cancer." Oncol Lett16(1): 395-401.  IF=1.664

43. 苏州大学第二附属医院：GPC-1对局部动脉内化疗后晚期胰腺癌患者的预后价值

Qian, J. Y., et al. (2018). "Prognostic valueof glypican-1 for patients with advanced pancreatic cancer following regionalintra-arterial chemotherapy." Oncol Lett 16(1): 1253-1258.  IF=1.664

44. 中国农业科学院：成年日本血吸虫细胞外囊泡的分离与鉴定

Liu, J., et al. (2018). "Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles from Adult Schistosomajaponicum." J Vis Exp (135). IF=1.184

45. 差速超速离心法和溶剂沉淀法分离的血浆外泌体比较

Peng, Q., et al. (2018). "Comparison of Plasma Exosomes by Differential Ultra centrifugation and Solvent Precipitation Methods." Clin Lab 64(6): 991-998. IF=0.848

46. 中南大学第三湘雅医院：胶质瘤细胞外泌体传递miR-148a靶向CADM1促进胶质母细胞瘤的增殖和转移

Cai, Q., et al.(2018). "Exosomes of glioma cells deliver miR-148a to promote proliferation and metastasis of glioblastoma via targeting CADM1miR-148a effecton glioma cells by CADM1." Bull Cancer. IF=0.84

47. 【综述】浙江大学附属二院：胰腺癌的液体活检——新时代的开始

Yadav, D. K., et al. (2018). "Liquid biopsy in pancreatic cancer: the beginning of a new era." Oncotarget 9(42):26900-26933.

48. 台湾辅仁大学：具有临床相关性的潜在microRNAs的挖掘——通过miR-122-5p调节syndecan-1表达改变乳腺癌细胞的移动性并可能与肝损伤相关

Uen, Y., et al. (2018). "Mining of potential microRNAs with clinical correlation - regulation of syndecan-1 expression by miR-122-5p altered mobility of breast cancer cells and possible correlation with liver injury." Oncotarget 9(46): 28165-28175.

49. 南方医科大学南方医院：脂多糖诱导巨噬细胞释放的外泌体在小鼠急性肺损伤中的作用及其机制

Zheng, B. B., et al. (2018). "[Role andmechanism of lipopolysaccharide induced exosome in the pathogenesis of acutelung injury]." Zhonghua Yi Xue Za Zhi 98(22): 1780-1785.

50. 国家癌症中心：肺鳞癌患者血浆外泌体中蛋白标志物的诊断价值

Sun, N., et al. (2018). "[Diagnostic value of protein markers in plasma exosomes of lung squamous cell carcinoma]."Zhonghua Zhong Liu Za Zhi 40(6): 418-421.

51. 中南大学湘雅医院感染病科：持续ALT正常的慢性乙型肝炎患者外泌体miRNAs表达谱

Li, R., et al. (2018). "[Expression profiles of the exosomal miRNAs in the chronic hepatitis B patients with persistently normal ALT]." Zhong Nan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban 43(5): 475-480.

2018年6月份国内外泌体领域的进展整理到此结束。希望大家有所收获。下个月见！（转化医学网360zhyx.com）