CRISPR重要成果:电穿孔技术改变游戏规则

简单的电穿孔似乎使T细胞更容易接受新的遗传物质，这可以加速免疫疗法的发展。

加州大学旧金山分校的研究人员发表了题为“Reprogramming human T cell function and specificity with non-viral genome targeting”的文章，指出快速的电流使得T细胞更容易接受新的遗传物质和基因编辑试剂，也就是说我们实验室常用的电穿孔技术（electroporation）竟能提高基因编辑的效率，而且无需病毒载体。

这一研究成果公布在7月11日的Nature杂志上。

“CRISPR基因编辑技术需要几个月甚至一年的时间，而最新技术将这一时间缩短到了几周，”文章作者之一，帕克癌症免疫疗法研究所副研究员Fred Ramsdell说， “如果你是癌症患者，几周与几个月可能会产生巨大的差异。”

传统上，研究人员使用病毒遗传改变免疫细胞进行免疫治疗。这些病毒将新基因注入T细胞，对于癌症患者来说，此时T细胞就能靶向肿瘤进行破坏。但是开发新病毒，编辑T细胞的遗传物质可能需要数年的时间，并且病毒只能将有限的DNA（几十种碱基）引入T细胞中。

为了加快这个过程，并增加DNA的长度（长达数百个碱基），加州大学旧金山分校的微生物学家和免疫学家Alexander Marson及其同事使用电穿孔技术让细胞放松，在没有病毒的情况下，允许新的遗传物质，以及包括CRISPR-Cas9在内的基因编辑工具进入。

不过研究人员表示，还不确定这究竟是什么原因。

“这是一个转折点，”牛津大学人类免疫学部主任Vincenzo Cerundolo（未参与这项研究），“这是该领域的一个改变游戏规则的发现，我相信这项技术有其优势。”

到目前为止，这一技术已用于调整健康供体T细胞中的遗传物质，并纠正患有自身免疫疾病的儿童细胞中的单个突变，但细胞还未进行人体实验，这一团队正在努力获得美国食品和药物管理局的批准，以便用经过调整的T细胞治疗儿童。

这一团队还需要回答一个关键问题：这些细胞是否可以安全用于人体？

同时，研究人员还测试了该技术改变T细胞靶向黑素瘤的能力，发现经过调整的免疫细胞攻击了小鼠的癌细胞。

Ramsdell表示，这项技术“真正为我们开辟了一种非常有创意，具有潜力的激活T细胞的独特方法。”

原文标题

Reprogramming human T cell function and specificity with non-viral genome targeting

（转化医学网360zhyx.com）