适用于粪便样本直接扩增的可风干DNA/RNA qPCR预混液
导读 | 迈迪安生物科技公司(Meridian)可风干直扩家族又添新成员,可风干粪便样本直扩DNA/RNA qPCR预混液和
Air-Dryable™ Direct DNA/RNA Stool qPCR Mixes |
迈迪安生物科技公司(Meridian)可风干直扩家族又添新成员啦!!
可风干粪便样本直扩DNA/RNA qPCR预混液
Air-Dryable™ Direct DNA/RNA Stool qPCR Mixes
该试剂有两款,一款专门适用于DNA模板(MDX140),另一款为可同时适用于RNA和DNA (MDX131,含逆转录酶)。 该产品不含甘4油,具有抗抑性,是专门为开发从粪便中免核酸提取、进行DNA/RNA 直扩的常温稳定型检测设计的一款qPCR试剂。
截止目前为止,迈迪安公司可风干分子检测试剂家族已经包含有:
NEW 可风干粪便直扩qPCR/RT-qPCR预混液
并且,迈迪安预计在接下来还将会推出专门针对尿液样本的可风干直扩qPCR/RT-qPCR预混液 (抗抑性)!相信迈迪安研发的该系列针对各种不同样本类型的可风干直接扩增分子试剂将为分子诊断检测带来革命性的拓展。
粪便中存在的PCR抑制物,如胆盐、多糖、血红素和代谢产物,是DNA/RNA直扩的挑战。此外,由于粪便样本的高度复杂性和异质性,通常需要对样本进行预处理以去除其中可能存在的干扰物质,如食物残渣、微生物、脱落的上皮细胞和粘液。
迈迪安新开发的可风干粪便直扩qPCR/RT- qPCR预混液是专门为粪便样本直扩开发的配方,可减少样本的处理步骤。该试剂含有优化的添加剂对抑制物有更强的耐受性,同时可保持样本的质量和完整性。它具有更短样本检测周转时间、更高灵敏度以及更长保质期的特点,能满足对胃肠道疾病快速、无创检测日益增加的需求。
如果您正在开发寄生虫、病毒、细菌的感染性疾病检测,或炎症性肠病或胃癌或结肠癌的筛查检测,使用可风干粪便直扩qPCR /RT-qPCR 预混液能缩短检测开发的时间, 只需要加入 引物探针即可。该产品既可以直接以液体形式使用,也可以风干成常温稳定的干燥型试剂使用, 避免昂贵复杂的冻干过程。
产品亮点:
• 使用简便
• 适用于从粪便样本中检测低量的RNA或DNA病原体和癌变物质的单重或多重检测
• 可用于液体或干燥形式检测,减少开发常温稳定检测的成本和操作
• 可兼容不同风干条件
在粪便样本中抑制物存在时的灵敏多重检测
分别使用可风干粪便qPCR直扩预混液 (蓝色)与供应商K (绿色)或供应商 Q (灰色) 在 2 mg/mL胆盐存在的情况下对粪便样本中的大肠杆菌O157 (维罗毒素基因), 鼠沙门氏菌(16S-23S rRNA基因内转录间隔体)和空肠弯曲菌(16S-23S rRNA基因内转录间隔体) 直接进行三重扩增。
结果显示,与供应商K和Q的试剂相比,可风干粪便直扩 qPCR预混液的扩增性能没有受到粪便样本中胆盐的抑制影响。
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分别使用可风干粪便RT-qPCR直扩预混液(蓝色)与供应商 T (红色) 或供应商Q (灰色)在2 mg/mL胆盐存在的情况下对粪便样本中的2个RNA靶标(轮状病毒和诺如病毒)和2个DNA靶标(腺病毒和空肠弯曲菌)直接进行四重扩增。
结果显示,与供应商T 和Q的试剂相比,可风干粪便直扩RT-qPCR预混液的扩增性能没有受到粪便样本中胆盐的抑制影响。
使用液体或者干燥形式对粪便样本的直接有效扩增
可风干粪便qPCR直扩预混液风干前后性能对比:对10%粪便样本中的灭活腺病毒(腺病毒2株)进行连续稀释10倍后(分别为8000、800、80、8 和0.8 ng) 分别使用湿液(黑色)和干燥试剂(红色)进行检测。结果显示可风干粪便qPCR直扩预混液风干前后具有一致的扩增效率、灵敏度和可重现性。
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可风干粪便RT-qPCR直扩预混液风干前后性能对比:对5%粪便样本中的假病毒RNA(MDX068)进行连续稀释10倍后(分别为10,000, 1,000, 100 和10个拷贝) 分别使用湿液(黑色)和干燥试剂(红色)进行检测。结果显示可风干粪便RT-qPCR直扩预混液风干前后具有一致的扩增效率、灵敏度和可重现性。
干燥后常温稳定性长达12个月
将可风干粪便直扩qPCR/RT-qPCR预混液干燥后进行加速热稳定性实验。试剂干燥后(红色)在 37ºC 保存4周,与新鲜液体试剂(黑色)进行对比: (A) 20%粪便样本的 qPCR检测 (B) 粪便样本中哺乳动物RNA的 RT-qPCR检测结果显示,风干后试剂与新鲜液体试剂具有一致的活性 (<0.5 ΔCt)。风干后试剂在常温下可保持稳定性长达12个月。
迈迪安公司除了有可风干的分子试剂外,也有性能卓越、广受市场和客户好评的可冻干PCR/RT-qPCR试剂以及各种聚合酶,Bst酶和逆转录酶,能满足不同客户在开发常温稳定干燥型分子检测过程中的不同需求。
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美国迈迪安生物科技是一家大规模生产各种抗体,各种病毒抗原,各种重组蛋白质,各类 PCR 多聚酶,各种核苷酸和体外诊断关键试剂的大型领军企业。40 年以来,迈迪安生命科学公司始终坚持以提供创新的生命科学解决方案和建立值得信赖的合作伙伴关系为我们的宗旨。我们的重点是为体外诊断试剂公司提供优质的原料和服务,使其有助于推动这些领域的发展。
(转化医学网360zhyx.com)
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