“三联疗法”抗肿瘤效果最强！华中科技大学同济医学院附属协和医院徐双兵、陈静发布肺癌治疗新策略

2024年3月22日，华中科技大学同济医学院附属协和医院徐双兵教授和陈静教授共同通讯在《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》上发表题为“CDKL1 potentiates the antitumor efficacy of radioimmunotherapy by binding to transcription factor YBX1 and blocking PD-L1 expression in lung cancer”的研究论文，研究发现，CDKL1下调并抑制肺癌细胞的生长和增殖，并增加体外和体内的放射敏感性。从机制上讲，CDKL1 与转录因子 YBX1 相互作用，降低 YBX1 对 PD-L1 基因启动子的结合亲和力，从而抑制 PD-L1 的表达，最终导致 CD8 T 细胞的活化和肺癌免疫逃逸的抑制。此外，CDKL1 过表达、放疗和抗 PD-L1 抗体疗法的组合对肺癌表现出最有效的抗肿瘤功效。总之，本研究结果表明，CDKL1在调节PD-L1表达中起着至关重要的作用，从而增强了放射免疫疗法的抗肿瘤作用。这些结果表明，CDKL1可能是治疗肺癌的一个有前途的治疗靶点。

https://jeccr.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13046-024-03007-w

研究背景

 01 

肺癌是全球公认的癌症相关死亡的主要原因，也是癌症中死亡率最高的癌症。肺癌的主要治疗选择包括手术干预、放疗（RT）、化疗、靶向治疗和免疫治疗。在这些方式中，检查点阻断免疫疗法，特别是针对程序性细胞死亡蛋白 1 （PD-1） 和程序性细胞死亡蛋白 1 配体 1 （PD-L1） 的疗法，已被证明可为非小细胞肺癌（NSCLC）患者提供长期临床益处。此外，局部放疗有可能诱导从免疫冷肿瘤表型转变为热肿瘤表型，从而增加免疫治疗的影响。然而，免疫治疗与放疗联合的临床结果仍然不尽如人意。帕博利珠单抗联合放疗治疗的转移性非小细胞肺癌患者的远隔缓解率为 41.7%。大量证据表明，肿瘤PD-L1的表达水平是评估肺癌患者对抗PD-1/PD-L1治疗临床反应的关键生物标志物。因此，探索PD-L1调控机制对于改善肺癌免疫治疗的反应非常重要。

研究进展

 02 

肿瘤细胞上高水平的 PD-L1 的存在阻碍了 CD8 T 细胞的活化，从而促进了肿瘤细胞的免疫逃避。因此，我们认为 CDKL1 介导的 PD-L1 调节可能会影响 CD8 T 细胞的活化。为了验证这一假设，我们培养了具有CDKL1过表达的Lewis细胞和从小鼠脾脏中提取的CD8 T细胞。流式细胞术清楚地表明，当CD8 T细胞与过表达CDKL1的细胞一起培养时，细胞毒性标志物IFN-γ和GZMB的表达显著增加（图6A）。随后，我们将过表达CDKL1的稳定Lewis细胞系接种到C57BL / 6J小鼠中，以建立皮下肿瘤模型。结果显示，在CDKL1过表达后，移植肿瘤的生长速度显著减慢，同时肿瘤的湿重降低（图6B，C）。为了阐明 CDKL1 在免疫逃逸中的作用，我们将肿瘤移植到单细胞悬浮液中，随后进行流式细胞术染色以评估 CD8 T 细胞的比例及其在肿瘤内分泌因子的水平。如图6D所示，在CDKL1过表达的肿瘤中，CD45+细胞中CD8 T细胞的比例增加，伴有IFN-γ和GZMB分泌的增加。这一发现表明，CDKL1具有刺激CD8 T细胞活化的潜力。总之，我们的研究结果表明，CDKL1诱导CD8 T细胞的活化，从而增强抗肿瘤免疫反应。

CDKL1 过表达在体内和体外抑制免疫逃避，三联疗法在肺癌中产生最有效的抗肿瘤结果。

鉴于裸鼠中CDKL1过表达与放疗的联合治疗效果增加，CDKL1过表达抑制PD-L1表达同时刺激CD8 T细胞活化，我们假设CDKL1过表达、放疗和免疫疗法（抗PD-L1抗体）的组合可能协同增强抗肿瘤反应。我们进行了一项研究，其中我们实施了单药治疗、双药治疗和三药治疗，涉及 CDKL1、RT 和抗 PD-L1 免疫疗法的过表达（图 6E）。为了评估这些治疗的疗效，我们建立了9组皮下移植肿瘤的C57BL / 6J小鼠，并评估了这些组的抗肿瘤作用。我们的研究结果表明，单独使用任何一种疗法治疗都能有效抑制肿瘤生长（图6F）。与对照组相比，其中两种疗法的组合具有更强的阻挠肿瘤生长的能力，而三联疗法对肿瘤生长的影响最大（图6F）。此外，单药组和双药组CD8 T细胞比例和细胞毒性IFN-γ CD8 T细胞比例均有所增加，三联疗法组的效果最为明显（图6G，H）。值得注意的是，当CD8 T细胞耗尽时，三联疗法的有效性显著降低（图6F-H），这表明CD8 T细胞在针对肿瘤的免疫反应中不可或缺。总的来说，这些发现表明，CDKL1过表达、放疗和抗PD-L1抗体治疗的联合给药对肺癌的抗肿瘤作用最强。

研究结论

 03 

综上所述，我们的研究全面了解了CDKL1在增强肺癌细胞的放射敏感性和抑制免疫逃逸方面的作用。此外，我们证明了 CDKL1 与 YBX1 相互作用，通过减少 YBX1 与 PD-L1 启动子的结合导致抑制 PD-L1 表达，从而激活 CD8 T 细胞反应并最终导致放射免疫治疗致敏（图 7）。这些发现为开发治疗肺癌的放射免疫增敏策略提供了新的分子靶点和临床前证据。

 CDKL1 参与肺癌免疫逃逸的机制模型。（A） CDKL1 的缺失促进 YBX1 与 PD-L1 启动子的结合，从而上调 PD-L1 的表达。这反过来又导致CD8 T细胞失活和随后的免疫逃逸，最终赋予对放射免疫治疗的耐药性。（B） CDKL1 与 YBX1 结合并抑制 YBX1 在 PD-L1 启动子上的积累，从而下调 PD-L1 的表达。PD-L1 表达的降低促进了 CD8 T 细胞的活化，最终使肺癌对放射免疫治疗敏感。（转化医学网360zhyx.com）

参考资料：

https://jeccr.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13046-024-03007-w

注：本文旨在介绍医学研究进展，不能作为治疗方案参考。如需获得健康指导，请至正规医院就诊。