【Nature子刊】郑州大学第一附属医院张明智团队：LMP1促进T细胞淋巴瘤的有氧糖酵解

2024年8月20日，郑州大学第一附属医院张明智团队在期刊《Cell Death & Disease》上发表了题为“LMP1 enhances aerobic glycolysis in natural killer/T cell lymphoma”的研究论文。本研究首次详细描述和定义了LMP1如何影响NKTCL的糖代谢，可能为进一步治疗提供新的视角。

https://www.nature.com/articles/s41419-024-06999-7

研究介绍

 01 

自然杀伤/T细胞淋巴瘤（Natural killer/T cell lymphoma， NKTCL）是世界卫生组织（World Health Organization， WHO）最新分类的T细胞和NK细胞淋巴增殖和淋巴瘤的亚型，具有高度侵袭性的临床行为，在亚洲和南美人群中尤为普遍。近几十年来，含有L-天冬酰胺酶的治疗方案，包括DDGP、改良的SMILE和P-GemOx，已被美国国家综合癌症网络的指南推荐，以改善临床预后。然而，复发和难治患者的结局仍不理想。考虑到NKTCL与EB病毒（EBV）感染的密切关联，靶向EBV为未来的治疗，提供了一种有前途的策略。

代谢通路的重编程被认为是肿瘤的重要标志，与肿瘤发生和疾病进展有关。研究表明，EBV及其编码的LMP1，可以通过增加血管内皮生长因子的表达，来刺激血管生成，抑制葡萄糖剥夺和代谢，以恢复对细胞凋亡诱导的敏感性，并通过减少单核细胞迁移和T细胞活化，以促进免疫逃逸。因此，靶向LMP1可能代表了一种通过干扰有氧糖酵解，来治疗EBV阳性恶性肿瘤的有前途的方法。

在本研究中，团队通过代谢测序结合mRNA测序和免疫沉淀（IP）与质谱联用，探讨了LMP1如何促进NKTCL的有氧糖酵解。实验测定了LMP1及其下游途径，对NKTCL细胞功能和葡萄糖代谢的影响；还分析了NKTCL患者LMP1表达，与其临床特征、治疗反应、预后、治疗前基线最大标准化摄取值（SUVmax）的相关性。

研究进展

 02 

非经典NF-κB通路的激活，影响NKTCL细胞中的有氧糖酵解

与OE-LMP1细胞相比，BAY 11-7082大大降低了葡萄糖摄取和乳酸产生。在YT和SNT16细胞中应用BAY 11-7082，可显著降低ECAR。OE-RelB在NKYS和SNK6细胞中增加。此外，糖酵解相关蛋白的表达，也通过蛋白质印迹法得到证实。综上所述，NF-κB通路的抑制或再激活，会影响NKTCL细胞的有氧糖酵解。

A 检测并分析了抑制NF-κB通路的相对葡萄糖摄取。B 在抑制NF-κB通路的情况下，检测和分析相对乳酸的产生。C 检测并分析相对葡萄糖摄取与NF-κB通路的再激活。D 检测和分析相对乳酸的产生与NF-κB通路的再激活。通过糖酵解应激法检测E ECAR，抑制NF-κB通路。F 糖酵解、糖酵解能力和糖酵解储备，在抑制NF-κB通路的情况下进行分析。通过糖酵解应激法检测G ECAR，NF-κB通路再激活。H 糖酵解、糖酵解能力和糖酵解储备与NF-κB通路的再激活进行了分析。I 通过Western blotting检测糖酵解相关蛋白的相对蛋白表达，抑制NF-κB通路。J 通过蛋白质印迹法检测糖酵解相关蛋白的表达，并激活NF-κB通路。NKTCL自然杀伤/T细胞淋巴瘤，OE-RelB过表达RelB，ECAR细胞外酸化率，无统计学意义。

非经典NF-κB通路的激活和有氧糖酵解，影响NKTCL细胞的侵袭性生物学功能

抑制NF-κB通路，显著抑制了NKTCL细胞的增殖。OE-RelB减弱了由shLMP1引起的NKTCL细胞增殖的减少，shLMP1也受到2-DG（一种有氧糖酵解抑制剂）的抑制。此外，BAY 11-7082降低了NKTCL细胞中吉西他滨的敏感性。OE-RelB促进了吉西他滨的敏感性，而2-DG处理则抑制了吉西他滨的敏感性。综上所述，非经典NF-κB通路的激活和有氧糖酵解，影响LMP1调节的NKTCL细胞的增殖和发育。

A CCK-8检测细胞增殖，抑制NF-κB通路。CCK-8检测B细胞增殖，重新激活NF-κB通路，并抑制糖酵解。C 通过流式细胞术检测饥饿诱导的细胞凋亡，抑制NF-κB通路。D 通过流式细胞术检测饥饿诱导的细胞凋亡，重新激活NF-κB通路并抑制糖酵解。CCK-8检测吉西他滨敏感性，抑制NF-κB通路。CCK-8检测F吉西他滨敏感性，重新激活NF-κB通路，并抑制糖酵解。NKTCL自然杀伤/T细胞淋巴瘤，CCK-8细胞计数试剂盒-8，无统计学意义，

研究结论

 03 

LMP1高表达在体外和体内，均能促进NKTCL细胞增殖，与异种移植小鼠组织中Ki67的表达，呈正相关。LMP1抑制饥饿诱导的细胞凋亡，并降低NKTCL细胞的吉西他滨敏感性。研究结果表明，LMP1影响NKTCL细胞的肿瘤发生和发育，并可作为NKTCL患者风险分层、治疗反应和预后的指标。

与LMP1阴性细胞相比，LMP1阳性NKTCL细胞，表现出更大的葡萄糖摄取和乳酸产生。ECAR受到LMP1表达的影响。在NKTCL患者中，异常高的LMP1表达，伴随着更大的SUVmax。从机制上讲，一些研究表明，LMP1通过调节致癌信号通路，参与表观遗传过程和激活鼻咽癌中的葡萄糖代谢酶，来促进有氧糖酵解。

在NF-κB通路的抑制下，NKTCL细胞表现出对有氧糖酵解的抑制，包括葡萄糖摄取、乳酸生成和ECAR的降低，而OE-RelB细胞对有氧糖酵解有促进作用。抑制NF-κB通路，可以抑制NKTCL细胞的侵袭行为，而OE-RelB细胞的抑制，可以恢复这些行为。此外，添加糖酵解抑制剂2-DG，可显著抑制生物细胞功能。

综上所述，本研究首次揭示了LMP1在促进NKTCL有氧糖酵解和侵袭性生物学功能中的作用和详细机制。研究结果揭示了病毒感染对NKTCL患者代谢异常的影响，为NKTCL患者的发病机制和发展提供了更多新的理解，为NKTLL的治疗提供了广阔的前景。

参考资料：

1.Alaggio R, Amador C, Anagnostopoulos I, Attygalle AD, Araujo IBO, Berti E, et al. The 5th edition of the World Health Organization Classification of Haematolymphoid Tumours: Lymphoid Neoplasms. Leukemia. 2022;36:1720–48.

2.Tse E, Zhao WL, Xiong J, Kwong YL. How we treat NK/T-cell lymphomas. J Hematol Oncol. 2022;15:74.