【突破】SARS-CoV-2感染检测新进展,RNA+血清学结合检测显锋芒
导读 | 目前检测新型冠状病毒感染的方法依赖于特定的基因序列,根据SARS-CoV-2基因组的快速测序和COVID-19爆发早期的数据分布,研究人员开发出多种测定方法。现如今研究人员设计针对病毒抗体的血液检测,这一进展将是监测病毒传播的重要下一步。 |
导读:目前检测新型冠状病毒感染的方法依赖于特定的基因序列,根据SARS-CoV-2基因组的快速测序和COVID-19爆发早期的数据分布,研究人员开发出多种测定方法。现如今研究人员设计针对病毒抗体的血液检测,这一进展将是监测病毒传播的重要下一步。
新加坡的研究人员首次应用Ab检测追踪COVID-19接触者。在无症状的核酸阴性接触中检测到抗体后,成功地追踪到了感染源,并确定了两个群集病例之间的联系。这一突破性发现也证实了血清学检测对于追踪隐性感染的来源具有重要意义。
我国《2019年冠状病毒病诊治方案》(第七版)指出,恢复期IgM、IgG的血清阳性率、IgG的血清转化率或血清IgG滴度较急性期增加4倍以上,是确诊病例的致病证据。总的来说,用于总抗体检测的双抗原夹心法比μ捕获法(常用于IgM抗体检测)和间接ELISA法(常用于IgG抗体检测)具有方法学上的优势:
1)同时检测IgM、IgG、IgA等多种抗体;
2)检测要求抗体分子的两个Fab片段分别与包衣抗原和标记抗原结合,这一特性显著降低了包衣抗原和标记抗原中的异质蛋白引起的非特异性结合,从而保证了较高的特异性。
3)由于外源蛋白在抗原中的干扰非常有限,提高包被抗原和标记抗原的浓度可以进一步提高检测的灵敏度。总抗体在保持特异性的同时,可提高诊断敏感性,是一种较好的早期诊断血清学指标。
总体上,ELISA法和化学发光法检测Ab具有取样方便、高通量、高效、可定量或半定量的特点,胶体金法是一种实时、重点检测的方法。以上抗体检测方法应作为不同情况下RNA检测的有效补充,以提高诊断的敏感性和特异性。Ab测试的应用可概括如下:
临床病人和密切接触者的筛选和管理:1)对RNA检测阴性的疑似病人和临床诊断病人,Ab阳性者可作COVID-19诊断;2)Ab阳性者,应将无症状密切接触者视为当前携带者或既往感染者。对于近距离接触,如果在检疫14天内,上呼吸道标本的RNA检测仍为阴性,Ab阳性意味着检疫观察的时间更长,应考虑下呼吸道和粪便标本的进一步采集和核酸检测;3) Ab试验可用于定量测定恢复期患者血浆抗体水平,认为高滴度抗体血浆有助于重症COVID-19患者的治疗。
重点人群筛查:结合RNA和Ab检测,可对COVID-19高发国家或地区的旅客、重要会议或活动的参与者、从高发地区返回工作或学校的人群进行筛查。对抗体阳性、RNA阴性的人群,也可进行检疫和健康监测,及时发现潜在病例,降低传播风险。
流行病学研究:1)将血清学检测与核酸检测及临床症状相结合,对SARS-CoV-2感染进行全谱分析,揭示隐性感染、非典型感染、轻症感染、重症感染的分布,以及每种感染对病毒和疾病传播的贡献;2)进行人群血清学调查,了解不同地区、不同人群,如不同年龄、不同职业、不同基础疾病人群中SARS-CoV-2感染的实际流行率和致病性,因此,建议适当的疾病控制干预措施;3)从疑似病例或确诊病例和血清学指标测试,核酸指标和其他实验室指标,分析其动态,从而完善COVID-19的诊断和治疗策略;4)分析恢复期COVID-19患者的抗体水平和抗体表位谱,为今后疫苗和治疗性抗体的设计和评价提供科学指导;5)支持寻找SARS-CoV-2潜在的动物宿主,因为双抗原夹心法检测出的总抗体不限于物种。
参考资料:
Ningshao Xia et al. Serological test is an efficient supplement of RNA detection for confirmation of SARS-CoV-2 infection. Preprints. 10 March, 2020.
近日,预印本网站Preprints上发表一篇重要结果,研究表明病毒RNA检测与血清学检测相结合,既能提高诊断的敏感性,又能保持较高的特异性。SARS-CoV-2特异性血清检测对临床实践和公共卫生具有重要价值。
迄今为止,病毒RNA检测几乎是证实SARS-CoV-2感染的唯一方法。但由于多种原因导致RNA检测灵敏度低,给疾病控制提出了严峻挑战。研究人员采用了化学发光法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金法检测血清总抗体(Ab)和免疫球蛋白(IgM)抗体。结果表明,三种方法对总Ab和IgM检测的敏感性和特异性均较高,与IgM相比,Ab检测的敏感性更高。
不同方法检测总抗体(Ab)和免疫球蛋白M(IgM)抗体的敏感性和特异性
注意事项:(1)括号内数据:阳性数/受检人数;(2)括号内数据:阴性数/健康受试者人数。
深圳市第三人民医院、厦门大学等单位确认患者接受了抗SARS-CoV-2的Ab、IgM和IgG检测后,结果表明,RNA和Ab试验的联合应用可以提高诊断的敏感性,同时保持较高的特异性,这被认为对临床实践和公共卫生具有重要价值。新加坡的研究人员首次应用Ab检测追踪COVID-19接触者。在无症状的核酸阴性接触中检测到抗体后,成功地追踪到了感染源,并确定了两个群集病例之间的联系。这一突破性发现也证实了血清学检测对于追踪隐性感染的来源具有重要意义。
我国《2019年冠状病毒病诊治方案》(第七版)指出,恢复期IgM、IgG的血清阳性率、IgG的血清转化率或血清IgG滴度较急性期增加4倍以上,是确诊病例的致病证据。总的来说,用于总抗体检测的双抗原夹心法比μ捕获法(常用于IgM抗体检测)和间接ELISA法(常用于IgG抗体检测)具有方法学上的优势:
1)同时检测IgM、IgG、IgA等多种抗体;
2)检测要求抗体分子的两个Fab片段分别与包衣抗原和标记抗原结合,这一特性显著降低了包衣抗原和标记抗原中的异质蛋白引起的非特异性结合,从而保证了较高的特异性。
3)由于外源蛋白在抗原中的干扰非常有限,提高包被抗原和标记抗原的浓度可以进一步提高检测的灵敏度。总抗体在保持特异性的同时,可提高诊断敏感性,是一种较好的早期诊断血清学指标。
总体上,ELISA法和化学发光法检测Ab具有取样方便、高通量、高效、可定量或半定量的特点,胶体金法是一种实时、重点检测的方法。以上抗体检测方法应作为不同情况下RNA检测的有效补充,以提高诊断的敏感性和特异性。Ab测试的应用可概括如下:
临床病人和密切接触者的筛选和管理:1)对RNA检测阴性的疑似病人和临床诊断病人,Ab阳性者可作COVID-19诊断;2)Ab阳性者,应将无症状密切接触者视为当前携带者或既往感染者。对于近距离接触,如果在检疫14天内,上呼吸道标本的RNA检测仍为阴性,Ab阳性意味着检疫观察的时间更长,应考虑下呼吸道和粪便标本的进一步采集和核酸检测;3) Ab试验可用于定量测定恢复期患者血浆抗体水平,认为高滴度抗体血浆有助于重症COVID-19患者的治疗。
重点人群筛查:结合RNA和Ab检测,可对COVID-19高发国家或地区的旅客、重要会议或活动的参与者、从高发地区返回工作或学校的人群进行筛查。对抗体阳性、RNA阴性的人群,也可进行检疫和健康监测,及时发现潜在病例,降低传播风险。
流行病学研究:1)将血清学检测与核酸检测及临床症状相结合,对SARS-CoV-2感染进行全谱分析,揭示隐性感染、非典型感染、轻症感染、重症感染的分布,以及每种感染对病毒和疾病传播的贡献;2)进行人群血清学调查,了解不同地区、不同人群,如不同年龄、不同职业、不同基础疾病人群中SARS-CoV-2感染的实际流行率和致病性,因此,建议适当的疾病控制干预措施;3)从疑似病例或确诊病例和血清学指标测试,核酸指标和其他实验室指标,分析其动态,从而完善COVID-19的诊断和治疗策略;4)分析恢复期COVID-19患者的抗体水平和抗体表位谱,为今后疫苗和治疗性抗体的设计和评价提供科学指导;5)支持寻找SARS-CoV-2潜在的动物宿主,因为双抗原夹心法检测出的总抗体不限于物种。
参考资料:
Ningshao Xia et al. Serological test is an efficient supplement of RNA detection for confirmation of SARS-CoV-2 infection. Preprints. 10 March, 2020.
(转化医学网360zhyx.com)
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