讲座回放|实时活细胞成像分析在3D细胞模型中的应用
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如今越来越多的科学家将目光从2D细胞模型转移到3D细胞模型。3D细胞模型不仅保留了前者的通量,而且从药物渗透,到细胞表型等方方面面都表现出了更贴近体内生理学的性质。
目前3D细胞培养的方式主要分两种:
不依赖支架的培养方案,如超低细胞吸附孔板、悬滴法、磁力悬浮法、微重力培养法等
基于支架的培养方案,如胞外基质凝胶、化学合成凝胶、3D打印
不依赖支架的3D细胞培养
美国斯坦福大学医学院的MichaelC.Bassik教授团队在Nature上发表文章[1],详细对比了在肺癌中肿瘤突变基因在2D单细胞层和3D细胞球体中的表型差异,并通过3D球体模型筛选出了被2D模型遗漏的靶点。该文采用了不依赖支架的培养方案,使用超低细胞吸附耗材进行3D细胞球体的培养。
在其中我们也看到了Incucyte®S3的身影!细胞的增殖和死亡均由Incucyte®S3进行实时监测。
将siRNA转染细胞,转移到Matrigel中,监测肿瘤球形态8天。
转染对照siRNA的细胞,最初成熟为分化良好的类器官,并在第8天左右自发形成侵袭性的多细胞结构,随后不久出现明显的侵袭。
有趣的是,HSF2沉默进一步增加了侵袭性,并且在更早的时间点即检测到侵袭的发生。
相反,HSF1沉默作为对照,干扰了腺泡分化,增加了细胞死亡率,从而阻止随后侵袭性结构的形成。
Incucyte®实时活细胞分析系统与Incucyte®肿瘤球分析模块的结合,可对肿瘤侵袭进行可重复和高通量分析,提高对细胞活动的深入理解,做出更明智的决定。
Incucyte®分析3D细胞模型的关键优势
获得更多生理相关信息-在不干扰培养箱内肿瘤球的情况下,对3D肿瘤球培养物进行无标记生长定量和形态学研究。揭示细胞随时间的变化-使用无干扰型试剂进行实时活力测定,研究作用机制。
生成可重现的定量数据-通过经实验室测试的方案、高质量图像和客观分析获得适用于药理学分析的可靠数据。
提高分析效率-可同时自动采集、分析和绘制多达六个96/384孔板的数千张图像,更快地获得结果。
扫描上方二维码,观看转化医学网和赛多利斯联合举办的“实时活细胞成像分析在3D细胞模型中的应用”在线讲座。
主讲内容:
1.实时活细胞成像与分析技术介绍;
2.实时活细胞分析促进3D细胞模型培养及应用;
3.应用案例解析
■实时监测肿瘤球/类器官生长状态;
■肿瘤球药敏及侵袭能力检测;
■免疫细胞杀伤
-参考文献-
Han,K.,Pierce,S.E.,Li,A.etal.CRISPRscreensincancerspheroidsidentify3Dgrowth-specificvulnerabilities.Nature580,136–141(2020).https://doi.org/10.1038/s41586-020-2099-xBjörk,J.,Åkerfelt,M.,Joutsen,J.etal.Heat-shockfactor2isasuppressorofprostatecancerinvasion.Oncogene35,1770–1784(2016).https://doi.org/10.1038/onc.2015.241
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